技术流程

1、收收集经过处理的细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30 min, 细胞裂解液于4 °C， 12000rpm离心30 min后取上清；

2、取少量裂解液以备免疫印迹分析，剩余裂解液中加入适量的相应抗体，4 °C缓慢摇晃孵育过夜；

3、取10μL protein A 或G琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗3次，每次3000 rpm离心3 min；

4、将预处理过的10 μl protein A 或G Agarose珠加入到经过与抗体孵育的细胞裂解液中4 °C缓慢摇晃孵育2~4 h，使抗体与protein A或G Agarose珠偶联；

5、免疫沉淀反应后，在4 °C 以3000 rpm 速度离心3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用1mL裂解缓冲液洗3－4次；最后加入15 μL的3×SDS 上样缓冲液，沸水煮5分钟；

6、SDS-PAGE, 免疫印迹或质谱仪分析。

二、样品要求

1、顾客提供：蛋白质样品（组织、细胞、蛋白质溶液等）、用于免疫共沉淀的一抗（如果公司抗体库里没有）及目的蛋白的相关信息；

2、需要通过转染载体表达基因的，提供表达载体，或本公司构建载体；

3、其他免疫共沉淀相关信息。

运输要求：干冰包装寄送。成都地区上门取样。